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酶（三）
1、酶促反应动力学（P351）
（一）酶促反应力学方程式
（二）米氏常数求法：
（1）双倒数法：
1 / v = Km / Vmax×1 /[S] + 1 / Vmax
以1 / v ~ 1 / [S]作图，见P363 图9-10
纵轴截距：1 / Vmax；横轴截距：-1 / Km；斜率：Km / Vmax。
（2）v ~ v / [S]法 （Eadic-Hofstee）：
v = -Km×v / [S] +Vmax 以v ~ v / [S]作图，见P363 图9-11。
斜率：-Km；纵轴截距：Vmax；横轴截距：Vmax / Km。
（3）[S] / v ~ [S]法 （Hanes-Woolf）：
[S] / v = Km / Vmax + 1 / Vmax×[S]
以[S] / v ~ [S]作图，见P363 图9-12
斜率：1 / Vmax；纵轴截距：Km / Vmax；横轴截距：-Km。
2、酶的抑制作用
失活作用：使酶蛋白变性而引起酶活力丧失。
抑制作用：酶的必需基团的化学性质改变而引起酶活力降低或丧失，但不引起酶蛋白变性。
引起抑制作用的物质称为抑制剂。研究酶的抑制剂，可以研究酶的结构与功能、酶催化机制，进行药物、农药的设计与筛选。
（一）一些重要的抑制剂：
（1）不可逆抑制剂：
1. 有机磷化合物：与脂酶活性部位Ser–OH共价结合，如抑制胆碱酯酶，使乙酰胆碱不能分解而积累，使一些以乙酰胆碱为传导介质的神经系统处于过于兴奋状态，引起神经中毒。
如神经毒剂和有机磷农药，结构式见P374。
可用能与磷酸根有更强结合力的化合物将酶游离出，从而解毒，如用肟类化合物解磷定，结构式见P374。
2.有机砷化合物：与酶中Cys-SH作用使人畜中毒。如有机砷化合物路易斯毒气（结构式见P375），可用含-SH的化合物作解毒剂，使酶恢复活性。
3.氰化物、CO、H2S与含铁卟啉的酶，如细胞色素氧化酶中的Fe2+络合，使酶失活，阻止呼吸。
4.青霉素：与糖肽转肽酶活性部位Ser-OH共价结合，使酶失活，抑制细菌细胞壁合成。青霉素与转肽酶的底物之一的酰基-D-Ala-D-Ala结构类似。
5.TLCK：根据底物的化学结构设计的专一性不可逆抑制剂。以胰蛋白酶底物对甲苯磺酰-L-赖氨酰甲酯（TLME）为模板，设计底物结构类似物对甲苯磺酰-L-赖氨酰氯甲酮（TLCK），与胰蛋白酶活性部位His57共价结合，引起不可逆失活。
（2）可逆抑制剂：
磺胺药：四氢叶酸（THF）是合成核酸和蛋白质酶的必需物质（辅酶）。根据人和细菌获THF途径不同设计磺胺类杀菌剂。
人体可直接从食物获取叶酸经DHF还原成THF而细菌只能从对氨基苯甲酸合成DHA。因此若抑制DHF合成酶，即可断绝细菌THF来源，从而抑制核酸和蛋白质的合成，而抗菌。
THF中对氨基苯甲酰胺部分的过渡态类似物对氨基苯磺酰胺可抑制DHF合成酶。
磺胺药抗菌谱广，性质稳定，对肺炎、痢疾等疗效显著。
此外抗癌药阿糖胞苷、氨甲喋呤等均为酶的竞争性抑制剂。
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