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【830生物化学】华工考点解析:蛋白质的分离纯化和利用!五分钟轻松掌握!

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发表于 2021-11-29 10:08:04 | 显示全部楼层 |阅读模式
 
每日考点

为了帮助各位22考研鹅在复习的过程中对基础知识加以强化巩固,火爆全网的《每日考点》专栏上线啦!
《每日考点》由华工直系学长、学姐围绕华工各专业近年高频考点,进行核心概念解析,全方位帮助你理解并记忆重要考点,进行查漏补缺式补充。(小编还贴心的准备了视频版+文字版哦~)

#视频版讲解 #


注:各位考生可以通过选择标清、高清和超清模式来播放视频。如果无法播放该视频请点击 830生物化学 链接播放。

#精简文字版 #


蛋白质的分离纯化和利用(论述题)
原则:蛋白质的分离纯化是依据不同蛋白质之间的相似性与差异性。首先依据相似性,除去非蛋白质的污染物,再利用各蛋白质之间的差异将目的蛋白从其他蛋白中分离纯化出来。每种蛋白质的大小、形状、电荷、疏水作用都会有差异,利用这种差异,可将蛋白质从混合物中分离出来得到纯蛋白。

1、材料的选择与破碎
根据实验目的选择合适的材料,如来源广泛,价格便宜,易操作,目的蛋白含量及生物活性较高。尽可能使细胞破碎,蛋白质充分释放出来。

2、建立蛋白质的活性测定方法
一般选择特异,快速,精确,可重复的方法。如总蛋白含量的测定、蛋白质的比活力、得率。
蛋白质的分离纯化应遵循分级分离,先粗后细的原则。

3、粗分级分离+精细纯化阶段 均采用树脂法。第一阶段是将蛋白质与DNA\RNA等其他细胞结构分开,选用高容量、大颗粒、大流速的树脂,必要时可加入相应的保护剂,防止目的蛋白质被降解。第二阶段将结构性质相似的蛋白质分离开来,采用更小的树脂颗粒以提高分辨率,一般采用离子交换柱和疏水柱。


分离纯化方法(简答、名词解释)
1、根据分子大小不同,透析和超过滤   密度梯度离心法。
2、利用溶解度差别分离 等电点沉淀法、盐析与盐溶、低温有机溶剂沉淀法。
3、根据电荷不同的分离方法 电泳 离子交换层析
4、蛋白质的选择吸附   羟磷灰石层析 疏水作用层析

蛋白质功能的多样性
第一节:核酸的种类、分布与功能
一、核酸的种类与分布
核酸(nucleic acid)——生物遗传信息的载体。


分布:
DNA——主要存在于细胞核中。
真核细胞中,DNA主要集中在细胞核内,少量在线粒体和叶绿体。
原核细胞没有明显的细胞核结构,DNA存在于称为类核的结构区。每个原核细胞只有一个染色体,每个染色体含一个双链环状DNA。
RNA——主要分布在细胞质中,少量存在于细胞核中。
病毒中RNA本身就是遗传信息的储存者。

二、核酸的生物学功能
核酸是生命遗传信息的携带者和传递者。
生命的延续
生物物种遗传特性的保持
生长发育
细胞分化
生物变异(如肿瘤、遗传病、代谢病等)

DNA:保留、传递生物物种的所有遗传信息——载体
基因(gene):DNA片断,含有合成蛋白质或RNA的所需的信息。
RNA:DNA遗传信息的翻译和表达——表达

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